| 更新時間： | 2025-01-01 |
| 型 號： | |
| 所屬分類： | 蛋白質(zhì)組學(xué)實驗 |
| 報 價： | 500 |
提供商: 上海研謹生物服務(wù)名稱: 同位素標記定量服務(wù)： 4-6周規(guī)格: 實驗服務(wù) 價格： 500元
同位素標記定量:
iTRAQ (isobaric Tags for Relative and Absolute Quantitation) &TMT (Tandem Mass Tags)分別由AB Sciex公司和Thermo公司研發(fā)的多肽體外標記定量技術(shù)，利用多種同位素試劑標記蛋白多肽N末端或者賴氨酸側(cè)鏈基團，不同分子量的試劑對不同來源的樣品進行標記從而實現(xiàn)不同樣品間蛋白質(zhì)組的比較。
iTRAQ實驗步驟:
1.樣品準備:將待測樣品進行定量計算出樣品蛋白濃度;
2.蛋白還原烷基化及酶解:每組樣品各取100μg按照iTRAQ試劑盒要求進行處理，使用測序級胰蛋白酶溶液酶解后,超濾管離心收集酶解肽段;
3. iTRAQ標記:將ITRAQ試劑平衡到室溫,用150μL異丙醇溶解，取酶解肽段加入iTRAQ試劑后室溫反應(yīng)2 h,加入水終止反應(yīng)，等量混合不同組樣品，真空冷凍干燥樣品: .
4. LC-MS-MS分析:使用Thermo的Q-Exactive Orbitrap進行串聯(lián)質(zhì)譜鑒定。
5.數(shù)據(jù)處理及生信分析
結(jié)果展示：
全局分析聚類熱圖
*0的蛋白數(shù)目統(tǒng)計分析
實驗周期及交付標準
1.實驗周期: 4-6周
2.交付標準:蛋白定量結(jié)果、鑒定結(jié)果、質(zhì)譜原始數(shù)據(jù)、生信分析結(jié)果(G0分析. KEGG分析等等)
需確認的信息
1.樣本的種屬
2.樣本的類型(組織or細胞or血液)
3.樣本的數(shù)量及分組
4.分析要求
參考文獻
[1]XuX，Zhu Q，Zhang R，et al. ITRAQ-Based Proteomics Analysis of Acute Lung Injury Induced by Oleic Acid in
Mice[J]. Cellular Physiology and Biochemistry, 2017:1949-1964.
[2]QuZ, GaoF , LiL, et al. Label-Free Quatitative Proteomic Analysis of Diferentially Expressed Membrane Proteins
of Pulmonary Alveolar Macrophages Infected with Highly Pathogenic Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome
Virus and Its Attenuated Strain[J]. PROTEOMICS, 2017:1700101.
實驗代做服務(wù)：
ELISA試劑盒免費代檢測 | CCK8檢測 | 基因組DNA提取
| 蛋白相互作用分析 |
Western Blot
| 免疫組化 | 熒光定量PCR | 動物模型服務(wù) |
流式細胞檢測 | 細胞增殖 | 激光共聚焦 | DNA甲基化實驗 |
細胞劃痕 | 鈣離子濃度檢測 | 掃描電鏡實驗 | microRNA 測序 |
動物實驗 | Taqman探針 | ATP/ADP檢測
| 石蠟/冰凍切片 |
定點突變 | 線粒體膜電位(MMP)檢測 | 細胞生長曲線的測定 | 藥理毒理動物實驗
|
免疫共沉淀 | 真核表達載體構(gòu)建 | 染色質(zhì)免疫沉淀CHIP | 非標定量（Label-free）實驗 |
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