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胰蛋白酶-EDTA溶液
胰蛋白酶-EDTA溶液
更新時間:2025-01-13
型    號:
所屬分類:常用試劑
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胰蛋白酶-EDTA溶液(0.05%:0.02%,含酚紅)
產品簡介:
胰蛋白酶(Trypsin)是由胰臟產生沒有活性的胰蛋白酶原分泌到小腸后,小腸內的腸肽酶會活化該酶原,形成胰蛋白酶。胰蛋白酶的特點在于已經活化的胰蛋白酶,能夠繼續(xù)活化
更多胰蛋白酶原,這種過程即自動催化。胰蛋白酶在小腸工作,它會將蛋白質水解為肽,進而分解為氨基酸,其Z適溫度約為 37℃。

胰蛋白酶-EDTA溶液產品概述:

研謹生物Trypsin-EDTA solution(0.05%:0.02%,含酚紅)由 0.05%胰酶、0.02%EDTA、

   少量酚紅等組成,經過濾除菌。本試劑可以直接用于培養(yǎng)細胞的消化,或者一些組織的消化,通常室溫下 1~2min 左右就可以消化下大多數貼壁細胞。

產品組成:

Trypsin-EDTA solution(0.05%:0.02%,含酚紅) 100ml -20℃

 

自備材料:

1、 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液

2、 顯微鏡

3、 離心機

操作步驟(僅供參考):

1、貼壁細胞的消化

①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。

②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min,

不同的細胞消化時間有所不同。

③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的*細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。

④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。

⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落,直接用胰酶細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量

去除胰酶細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。

2、組織的消化

不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

注意事項:

1、 盡量減少反復凍融的次數,以免失效。

2、在使用 Trypsin-EDTA solution 過程中,要特別注意避免消化液被細菌污染。3、Trypsin-EDTA solution 消化細胞時間不宜過長,否則細胞鋪板后生長狀況會較差。

4、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

有效期: 12 個月有效。

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