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姬姆薩染色液(Giemsa Stain,1:9)
姬姆薩染色液(Giemsa Stain,1:9)
更新時(shí)間:2025-01-14
型    號(hào):
所屬分類:染色劑(Sigma原裝)
報(bào)    價(jià):100
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姬姆薩染色液(Giemsa Stain,1:9)
介紹:主要由吉姆薩原液、磷酸鹽緩沖液組成,按1:9混合使用。細(xì)胞核呈紫紅色或藍(lán)紫色,胞漿呈粉紅色。
儲(chǔ)存條件:RT,24個(gè)月
用途:血液和細(xì)胞涂片、細(xì)菌、染色體顯帶、原生動(dòng)物寄生蟲等染色

姬姆薩染色液(Giemsa Stain,1:9)產(chǎn)品概述:

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

姬姆薩染色液(Giemsa Stain,1:9)

 

姬姆薩色素(又稱吉姆薩色素)是由天青Ⅱ與伊紅混合而成。Giemsa 染色原理和結(jié)果與瑞氏染色基本相同,姬姆薩染色液對(duì)胞漿著色力較強(qiáng),能較好的顯示胞漿的嗜堿性程度,特別是對(duì)血液和骨髓細(xì)胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜堿性顆粒,著色清晰,但是對(duì)胞核著色偏深,   核結(jié)構(gòu)顯色不佳,故姬姆薩染液常與瑞氏染液聯(lián)合使用。Giemsa Stain 以進(jìn)口的姬姆薩色素、甲醇為主要原料,含*襯染劑,經(jīng)研磨配制而成,能呈現(xiàn)出清晰的細(xì)胞染色效果,經(jīng)常用于組織切片、血液和細(xì)胞涂片、細(xì)菌、染色體顯帶、原生動(dòng)物寄生蟲等染色。嗜酸性顆粒為堿性蛋白質(zhì),與酸性染料伊紅結(jié)合,染粉紅色,稱為嗜酸性物質(zhì);細(xì)胞核蛋白和淋巴細(xì)胞胞漿為酸性,與堿性染料美藍(lán)或天青結(jié)合,染紫藍(lán)色,稱為嗜堿性物質(zhì);中性顆粒呈等電狀態(tài)與伊紅和美藍(lán)均可結(jié)合,染淡紫色,稱為中性物質(zhì)。

 Giemsa Stain(1:9)由 10×儲(chǔ)存液和磷酸鹽緩沖液組成,1:9  混合成工作液后

使用;亦可以分開使用,即先用 Giemsa Stain 染色,再經(jīng)磷酸鹽緩沖液處理,亦可以得到

滿意的染色效果。

 

產(chǎn)品組成:

                            100ml 500ml

試劑(A): Giemsa Stain 儲(chǔ)存液(10×)               10ml  50ml  RT 避 光

試劑(B): 磷酸鹽緩沖液                                     100ml  500ml    RT

                                                          

自備材料:

1、 載玻片、顯微鏡

2、 蒸餾水

3、 甲醇

4、 0.1~0.5%乙酸

操作步驟(僅供參考):

(一)一步法涂片染色

1、Giemsa 工作液的配制:

按試劑(A):試劑(B)=1:9 混合,即取1份 Giemsa Stain 儲(chǔ)存液(10×)加入到9份的磷酸鹽緩沖液中充分混勻,即為Giemsa 工作液,為即用型試劑,不易保存,即用即配。

2、常規(guī)方法制備血液涂片或骨髓涂片,待涂片自然干燥后,用甲醇固定 1~3min。

3、將血液涂片或骨髓涂片置于染色架上,滴加 Giemsa 工作液覆蓋涂片,室溫滴染 15~       30min。

4、用自來水或蒸餾水緩慢從玻片一端沖洗。

5、干燥、鏡檢。

染色結(jié)果:

                   嗜酸性顆粒         粉紅色

                         嗜堿性顆粒         紫藍(lán)色

         中性顆粒           淡紫色

(二)兩步法涂片染色

1、Giemsa 工作液的配制:

粉紅色紫藍(lán)色淡紫色按試劑(A):蒸餾水=1:4 混合,即取1 份的 Giemsa Stain 儲(chǔ)存液(10×)加入到 4 份的蒸餾水中充分混勻,即為 Giemsa 工作液。Giemsa 工作液為即用型試劑,不易保存,即用即配。

2、常規(guī)方法制備血液涂片或骨髓涂片,待涂片自然干燥后,用甲醇固定 1~3min。

3、將血液涂片或骨髓涂片置于染色架上,滴加適量 Giemsa 工作液覆蓋涂片,室溫滴染

10~15min。

4、加入等量磷酸鹽緩沖液,輕輕晃動(dòng)載玻片,室溫靜置 5~10min。

5、用自來水或蒸餾水緩慢從玻片一端沖洗。

6、干燥、鏡檢。

染色結(jié)果:          嗜酸性顆粒           粉紅色

              嗜堿性顆粒           紫藍(lán)色

              中性顆粒             淡紫色

(三)組織切片染色

1、Giemsa 工作液的配制:

粉紅色紫藍(lán)色淡紫色按試劑(A):試劑(B) =1:9 混合,即取 1 份 Giemsa Stain 儲(chǔ)存液(10×)加入到 9 份磷酸鹽緩沖液中充分混勻,即為 Giemsa 工作液。Giemsa 工作液為即用型試劑,不易保存,即用即配。

2、新鮮組織立即置于 Regaud 固定液固定 2 天,期間應(yīng)更換 1 次固定液。

3、3%重鉻酸鉀固定 1 天。

4、流水沖洗 16 個(gè)小時(shí)或過夜。

5、照常規(guī)脫水、包埋。

6、切片厚度約為 5μm,常規(guī)脫蠟至水。

7、蒸餾水清洗 2 次,每次 1min。

8、入含 Giemsa 工作液染缸,浸染 18~24h。

9、蒸餾水稍微清洗。

10、0.1~0.5%乙酸洗 1~2min。

11、自來水稍沖洗。

12、用無水乙醇迅速脫水 3 次,每次 5~10s。

13、二甲苯透明,中性樹脂封固。

染色結(jié)果:

細(xì)胞核                     藍(lán)色至紫色

細(xì)胞質(zhì)                     淡藍(lán)色

嗜鉻細(xì)胞胞質(zhì)               黃綠色

結(jié)締組織                   淡紅色

注意事項(xiàng):

1、血液涂片或骨髓涂片應(yīng)厚薄均勻,以免影響染色效果。

2、涂片染色中 Giemsa 染色后,請(qǐng)勿先去除染液或直接對(duì)涂片用力沖洗。

3、如果染色過深或過淺,應(yīng)調(diào)整染色時(shí)間或工作液濃度。

4、涂片染色和組織切片染色中,pH 值對(duì)染色有一定影響,載玻片應(yīng)清潔、無酸堿污染,以免影響染色效果。

5、染色液經(jīng)稀釋后液面應(yīng)金屬光澤則表示染液有染色作用,否則染色液可能失效。

6、組織切片染色中,染色后需用大量 0.1~0.5%乙酸急速?zèng)_洗,避免浮面沉淀物污染切片后難以洗脫。

7、0.5%乙酸分化常用于 Giemsa 組織切片染色,如有必要亦可用于細(xì)胞涂片,但其濃度應(yīng)適量下調(diào)。0.5%乙酸分化切片時(shí),切片呈粉紅色即可終止。

8、Giemsa 組織切片染色中,無水乙醇脫水要迅速,否則切片易褪色。

9、涂片染色和組織切片染色中,如需急速獲得結(jié)果,可按 Giemsa  Stain儲(chǔ)存液(10×):磷酸鹽緩沖液=1:1 配制 Giemsa 工作液,充分混勻,即為快速 Giemsa 染色工作液,將染色液滴加于細(xì)胞涂片或組織切片上,加熱染色,20~30s 后重新加染色液,反復(fù) 5~10 次,其余步驟同上。

10、染色液可重復(fù)使用,但不能多次重復(fù),若有沉淀物應(yīng)過濾后使用。

11、Regaud 固定液: 按3%重鉻酸鉀: 甲醛=4:1 配制,臨用前混勻,1~2 天后失效。

有效期:24 個(gè)月有效。

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