細胞分離液廠家告訴你細胞分離的那些事兒
細胞分離是指將組織分散制成細胞懸液后從中獲取目的細胞的過程。細胞純化更進一步強調(diào)從原代培養(yǎng)前成分混雜的異質(zhì)性細胞懸液中或者從培養(yǎng)物中獲得單一類型細胞的過程。
分離和純化細胞的過程不僅僅在原代培養(yǎng)之前進行的，有時分離和純化細胞的過程還貫穿于原代培養(yǎng)和繼代培養(yǎng)的過程中，甚至是主要依賴培養(yǎng)過程實現(xiàn)分離和純化細胞的目的。
細胞分離純化的方法有密度梯度離心技術、逆流淘析分離技術、利用細胞表面標志分離純化細胞的方法等。
密度梯度離心技術
原理：密度梯度離心法是使待分離樣品在密度梯度介質(zhì)中進行離心沉降或沉降平衡，終分配到梯度中某些特定位置上，形成不同區(qū)帶的分離方法，又稱區(qū)帶離心。密度梯度離心不僅可依據(jù)樣品顆粒的重量及沉降系數(shù)進行分離，還可根據(jù)樣品顆粒的密度、形狀等特征進行分離。
使用方法：密度梯度離心在整個離心過程中只使用一種轉(zhuǎn)速，中途無需變更實驗參數(shù)，而差速離心則需要進行調(diào)整轉(zhuǎn)速、重懸反復離心等操作。密度梯度離心適宜分離密度有一定差異的樣品，而差速離心則適用于分離混合樣品中各沉降系數(shù)差別較大的組分。
優(yōu)點：分離效果好、適應范圍廣、 對溫度變化及加減速引起的擾動不敏感。
缺點：離心時間長、需制備密度梯度介質(zhì)溶液、對操作者的技能要求較高。
劃分：根據(jù)梯度介質(zhì)的濃度及顆粒在其中沉降的行為，密度梯度離心又分為：速度區(qū)帶離心、等密度梯度離心！
逆流淘析分離技術
簡述：通過含細胞介質(zhì)溶液的流力和浮力與細胞所受離心力之間相互作用而分離細胞的一種技術。
原理：細胞置于一特殊的離心室中，離心室成錐形狀，其定點指向沉降方向，細胞懸浮于以向心方向連續(xù)流動的介質(zhì)溶液中，同時受到離心力的作用。當向外的離心力于內(nèi)向的流立即浮力達到平衡時，每個細胞將按照它的的沉降速率達到其平衡位置。
常用于：進一步分離淋巴細胞和單核細胞。
選擇性細胞凝集
簡述：羥乙基淀粉和纖維素可以使紅細胞形成大的“錢串”，加速其沉降，從而比其他細胞更快地從造血細胞懸液中沉降出去。
常用于：這一方法通常用于快速去除大量成熟紅細胞，而不會對有核細胞群造成太大的損失。但是，與上面提到的密度梯度離心和逆流淘析步驟一樣，這一方法并沒有使干細胞群相對于有核細胞發(fā)生太多的富集。
基于不同粘附特性的細胞分離方法
簡述：粘附于某些固相物質(zhì)如玻璃或塑料的表面，使某些類型細胞的基本生物學特性之一，但另一些細胞卻缺乏這種能力；或某些細胞的粘附能力強，粘附作用快，而某些細胞的粘附能力弱或粘附作用慢。根據(jù)這些差異，可以分離或消除某些類型的細胞。這種將粘附較快的細胞與粘附較慢的細胞（貨物粘附能力）的細胞分離開來并分別收集的處理過程就稱為差粘附處理。
常用于：分離細胞懸液中的成纖維細胞與其它組織細胞。
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